一、透析原理

自Thomas Graham 1861年发明透析方法以来，透析已成为生物化学实验室最简便最常用的分离纯化技术之一。在生物大分子的制备过程中，除盐、除少量有机溶剂、除去生物小分子杂质和浓缩样品等都要用到透析的技术。

透析只需要使用专用的半透膜即可完成。通常是将半透膜制成袋状，将生物大分子样品溶液置入袋内，将此透析袋浸入水或缓冲液中，样品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋内，而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外，直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”，袋（膜）外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。

透析的动力是扩散压，扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。透析的速度反比于膜的厚度，正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度，还正比于膜的面积和温度，通常是4℃透析，升高温度可加快透析速度。

二、透析袋的选择

1、正确选择合适的截留分子量

截留分子量的选择是以预留在膜内的大分子的分子量和将要被除去的小分子污染物的分子量为基础。为达到合理有效的分离，需分离的两种物质分子量的比率至少为25。选择截留分子量值约为要保留的大分子分子量的一半，以获得至少90%的保留率。

透析袋截留分子量选择参照表（常见物质分子量和直径大小，主要是蛋白类物质）。

透析袋孔径参考表

2、正确选择扁平宽度

透析袋扁平宽度的选择取决于样品体积和透析容量。较小的透析管透析更快；较大的透析管因扩散距离较长透析较慢。为易于使用，建议使用总长（包括闭合夹和顶部空间）为大约10-15厘米的透析袋。

3、透析袋的化学兼容性

化学兼容性主要用作使用指导，不作为化学相容的保证。温度、浓度、长时间曝光等因素的改变可能影响产品的使用。建议您自设条件进行测试。

三、透析袋使用方法

百瑞极可提供干型透析袋和即用型透析袋，满足不同实验场景的需求。

百瑞极干型透析袋，甘油涂层，使用前需预处理：

1、把透析袋剪成适当长度（10-20cm）的小段。  

2、在大体积（500mL）的2%（W/V）的碳酸氢钠和1mmol/L EDTA (pH=8.0)中将透析袋煮沸10min。

3、用蒸馏水彻底清洗透析袋。

4、放在500mL的1 mmol/L EDTA (pH=8.0)中将之煮沸10min。

5、冷却后，置于20％的酒精中，放于4℃冰箱，必须确保透析袋始终浸没在溶液内。从此时起取用透析袋必须戴手套。

6、在使用前要用蒸馏水将透析袋里外加以清洗干净。

百瑞极即用型透析袋，无需预处理，用水清洗即可使用：

1、先带好手套，把透析袋剪成适当长度（10cm 左右）的小段，长度可以根据需要，但必须有足够的容器来容纳。

2、用蒸馏水彻底清洗透析袋，两头用手微微捏住，检查是否有漏袋。透析袋保存液含有防腐剂，对活性物质有抑制作用，至少用蒸馏水（纯水、去离子水均可）反复冲洗三次，有时间最好用蒸馏水浸泡30分钟再使用。

3、不使用的透析膜放回储存液中，密封保存，接触透析膜过程中必须戴手套。

4、使用时，一端用透析袋夹子夹紧，灌满水后，用手指适当加压，检查不漏，另一头也同样反复一次，以免夹子不够紧。然后装入样品，通常要留三分之一至一半的空间，以防透析过程中，袋外的水和缓冲液过量进入袋内将袋胀破。装完样品后，用夹子夹紧袋口，即可进行透析。为了加快透析速度，除多次更换透析缓冲液外，还可使用磁力搅拌器。透析的容器要大一些，可以使用大烧杯、大量筒和塑料桶。根据样品浓度决定透析时间，也可以过夜透析，透析时间在24~48小时为宜。用线吊着透析袋，使透析袋处于悬浮状态，也可以加速透析速度。

四、百瑞极相关产品

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