
秉承“从干细胞到功能单元”的核心技术理念,逸漠生物推出的hPSC诱导分化胰岛类器官试剂盒,采用化学成分明确的分阶段诱导体系,通过精确模拟胰岛发育过程中的关键信号通路调控,能够高效地将hPSCs定向诱导为表达GCG和NKX6.1等关键标志物的胰岛类器官。该试剂盒为糖尿病机制研究、药物筛选及细胞治疗开发提供了标准化、可重复且功能可靠的模型,助力科研人员加速相关领域的科学发现与临床转化。

采用六阶段精准诱导策略(内胚层诱导→肠管内胚层→胰腺内胚层→胰腺祖细胞→内分泌祖细胞→胰岛类器官),模拟体内胰岛发育过程,高效获得共表达关键标志物 GCG和NKX6.1 的胰岛类器官。
2. 标准化与操作便捷性
提供化学成分明确、无血清的完整培养体系,所有组分预优化并清晰分装,将复杂的分化流程简化为易于操作的标准化步骤,确保不同细胞系、不同批次实验的高可重复性。
适用于多种人ES和iPS细胞系,与主流干细胞培养体系兼容。分化得到的胰岛类器官可模拟天然胰岛血糖调节功能,疾病建模与药物筛选。
诱导分化流程
产品特点:逸漠生物这款试剂盒将复杂的胰岛发育过程转化为标准化、可预期的实验模块,帮助研究人员绕过繁琐的体系优化,直接获得高质量的功能性胰岛类器官,加速糖尿病及相关领域的科学发现与临床转化进程。

DAY-1: hESC的汇合度达到75%-85%,解离为单细胞,加入1mL预热的hESC/iPSC完全培养基,培养24h。
DAY 0: 24h后吸去培养基(密度应为100%),并加入2mL 诱导培养基S1a(成分为:基础培养基1-2,1×补充剂S1a)培养24h。
DAY 1: 24h后吸去培养基,使用诱导培养基S1b(成分为:基础培养基1-2,1×补充剂S1b)换液,期间根据培养基颜色每天或隔天换液,培养至第4天。

DAY4:第4天,从培养物中抽吸培养基,在6孔板中每孔用2 mL 1×室温PBS(不含Ca2+/Mg2+)清洗培养物,然后从孔中移除PBS。使用2mL预热的诱导培养基S2(成分为:基础培养基1-2,1×补充剂S2)换液,培养至第7天。

DAY7: 第7天,从培养物中抽吸培养基,在6孔板中每孔用2 mL1×室温PBS(不含Ca2+/Mg2+)清洗培养物,吸去PBS。使用2mL预热的诱导培养基S3(成分为:基础培养基3-4,1×补充剂S3)换液,培养至第10天。

DAY10: 第10天,从培养物中抽吸培养基,在6孔板中每孔用2 mL1×室温PBS(不含Ca2+/Mg2+)清洗培养物,吸去PBS。使用2mL预热的诱导培养基S4(成分为:基础培养基3-4,1×补充剂S4)换液,培养至第14天。

DAY 14: 第14天,弃去培养基,每孔加入1 mL TrypLE于培养箱消化3-10分钟。之后使用1 mL DMEM培养基中止消化,吹下并转移至15mL离心管于300g离心3min。弃上清,使用诱导培养基S4(含10uM Y27632)重悬。按4-8×105个细胞/孔的密度接种于垫有细胞培养片(细胞培养片使用方法参照该产品说明书)的24孔板内培养24h,使其形成100-200 um左右的细胞球。


DAY 21: 第21天,使用2mL预热的诱导培养基S6(成分为:基础培养基6,1×补充剂S6)换液,根据培养基颜色隔1-2天使用诱导培养基S6换液,直到第28天。后续可继续维持培养至少7天。
免疫荧光检测

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