β-淀粉样蛋白(Aβ)是阿尔茨海默病病理特征神经炎性斑的主要成分。淀粉样蛋白级联假说认为,Aβ的积累会引起神经原纤维缠结和神经变性,从而导致认知功能障碍。据报告,Aβ在阿尔茨海默病发病前20多年就开始逐渐积累,早期检测Aβ的积累有望预防和治疗阿尔茨海默病。此外,自从有报告指出可溶性β-淀粉样蛋白的寡聚体(Aβ寡聚体)具有神经毒性以来,“Aβ寡聚体假说”也备受关注,该假说认为Aβ寡聚体可能参与阿尔茨海默病中的神经细胞死亡。
FUJIFILM Wako的Aβ ELISA试剂盒使用武田药品工业开发的高特异性单克隆抗体。不仅可检测组织提取液、细胞培养上清和脑脊液,还可以检测传统试剂盒难以检测的血浆中Aβ40和Aβ42,现已在多篇论文中发表。另外,目前还开发了可特异性检测人血清,血浆及脑脊髓液中9聚体及以上的Aβ寡聚体的ELISA试剂盒。
何谓β-淀粉样蛋白(Aβ)?
β-淀粉样蛋白(Aβ)是含约40个氨基酸的多肽,也是阿尔茨海默病病理特征⸺神经炎性斑的主要成分。淀粉样蛋白级联假说认为,Aβ的积累会引起神经原纤维缠结和神经变性,从而导致认知功能障碍。据报告,Aβ在阿尔茨海默病发病前20多年就开始逐渐积累1),早期检测Aβ的积累有望预防和治疗阿尔茨海默病。
Aβ根据氨基酸的长度可分为几种分子,Aβ40和Aβ42主要由神经细胞分泌。其中Aβ42具有高聚集性和毒性,与疾病的发生和发展密切相关。此外,与健康者相比,阿尔茨海默病患者脑脊液(CSF)中的Aβ42减少2),Aβ42或Aβ42/Aβ40比值可用作阿尔茨海默病的早期生物标志物。血浆Aβ42/Aβ40比值也与脑内Aβ积累相关3),因此作为比CSF采样更容易的生物标志物而被寄予厚望,但其准确度仍存在局限,需进一步研究。
自从有报告指出可溶性β-淀粉样蛋白寡聚体(Aβ寡聚体)具有神经毒性以来,学术界提出了“Aβ寡聚体假说”,该假说认为Aβ寡聚体可能参与阿尔茨海默病中的神经元死亡4)。尽管发挥细胞毒性的寡聚体分子量等特征目前尚存争议,但其作为阿尔茨海默病治疗靶点的前景可期。此外,与Aβ42一样,CSF中的Aβ寡聚体也有望成为阿尔茨海默病诊断及病情评估的有效生物标志物5)。
Aβ ELISA试剂盒
FUJIFILM Wako的Aβ ELISA试剂盒使用武田药品工业开发的高特异性单克隆抗体。不仅可检测组织提取液、细胞培养上清和CSF,还可以检测传统试剂盒难以检测的血浆Aβ40和Aβ42,现已在多篇论文中发表。
■ 产品系列



※ 虽然可以检测,但与血浆相比检测数值会随时间降低
■ 数据
检测人和小鼠血浆
使用EDTA-2K真空采血管采血,5,000×g、4℃离心15分钟分离血浆,使用前于-80℃保存。检测时,使用试剂盒附带的标准品稀释液将样品稀释4倍后,检测Aβ水平。
<使用试剂盒>
Aβ(x-40):人/大鼠β-淀粉样蛋白(40)ELISA试剂盒Wako-Ⅱ
Aβ(x-42):人/大鼠β-淀粉样蛋白(42)ELISA试剂盒Wako,高灵敏度
Aβ(1-40):人β-淀粉样蛋白(1-40)ELISA试剂盒Wako-Ⅱ
Aβ(1-42):人β-淀粉样蛋白(1-42)ELISA试剂盒Wako,高灵敏度

数据提供:东京大学大学院医学系研究科神经病理学领域岩坪老师、桥本老师
高分子β-淀粉样蛋白寡聚体ELISA试剂盒Ver.2
FUJIFILM Wako的高分子β-淀粉样蛋白寡聚体ELISA试剂盒Wako Ver.2,可检测人血清、血浆和脑脊液中的Aβ寡聚体。使用对Aβ具有高亲和力的抗体(克隆编号:BAN50),可特异性检测9聚体及以上的Aβ寡聚体5-6)。
■ 试剂盒性能

■ 检测原理

使用抗Aβ抗体(BAN50)作为捕获抗体和检测抗体的夹心法ELISA试剂盒,可与9聚体及以上的Aβ寡聚体发生特异性反应,而与1-8聚体几乎不发生反应5-6)。标准品使用16聚体MAP肽,它具有16个抗Aβ抗体(BAN50)的抗体识别序列6)。
■ 数据
对高分子Aβ寡聚体的特异性
将Aβ1-42肽(单体)冷藏孵育过夜,通过超滤分离为30 kDa以上(9聚体以上,Fraction A)和不足30 kDa(8聚体以下,Fraction B)两组,并使用抗Aβ抗体(BAN50)对各组分进行Western Blotting和ELISA检测。

【结果】
Aβ寡聚体经Western blotting按分子量分离。并且在ELISA中,8聚体以下的Fraction B几乎检测不到信号,而9聚体及以上的Fraction A则检测到强烈的信号。
临床样品检测
检测非痴呆症患者(对照组)、轻度认知障碍患者(MCI)和阿尔茨海默病患者(AD)脑脊液中的高分子Aβ寡聚体,并分析与MMSE Score的相关性。
MMSE Score
23分以下:疑似痴呆症
24-27分:疑似轻度认知障碍
28-30分:正常

【结果】
对照组、MCI、AD组间的高分子Aβ寡聚体的检测值存在显著差异。检测值与MMSE Score呈负相关。
产品列表
■ β-淀粉样蛋白(Aβ)ELISA试剂盒

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