基质胶是一种从富含胞外基质蛋白的小鼠肿瘤中提取的基底膜基质，广泛用于类器官构建、体外血管生成、细胞侵袭迁移、体内成瘤及干细胞培养等实验。不同实验对基质胶的生长因子含量、蛋白浓度、内毒素水平及力学性能各有特定要求，选胶不当直接影响实验重现性与数据可靠性。 

作为深耕类器官上游应用核心原料领域的专业供应商，模基生物实现了基质胶全流程自研自产，两款应用于干细胞与类器官构建的核心基质胶产品获美国 FDA DMF 备案。本文基于实测数据系统梳理模基金牌基质胶在体外血管生成、类器官构建、Transwell 侵袭、裸鼠体内成瘤以及干细胞培养五个实验场景中的适配策略与验证结果。

体外血管生成

082704、082706（标准型基质胶）——标准型里面的生长因子可以给细胞提供营养，促进成管。

基质胶置于碎冰中4℃低温融化、基质胶:基础培养基=1:0/2:1比例进行稀释。以8-10μL/孔加到15孔板（MS-TBFMW15）中（96孔板 50uL基质胶/孔）,在37℃培养箱中,凝固15-20min。取出HUVEC细胞，胰酶消化。用ECM培养基重悬细胞，并计数,每孔加入50μL细胞悬液（96孔板每孔1-2万cell；15孔板每孔8000-10000cell）,37℃培养4小时。

细胞量：细胞太多，可见细胞连成片；细胞太少，可见细胞之间没有完全连成丝，断断续续连接。如下图所示：

接种前务必充分吹打混匀细胞悬液，避免细胞沉降导致局部密度不均。基质胶和培养基温差太大，导致气泡析出，建议先预热培养基，再加入培养基或者换液。

类器官的建立与长期传代高度依赖基质胶提供的仿生基底膜微环境：层粘连蛋白与IV型胶原构成的3D支架维持类器官囊性结构，而外源性生长因子含量则直接影响类器官分化方向与贴壁倾向。

082755（类器官专用基质胶）082703——在低生长因子基质胶的基础上进一步筛选优化，使类器官金牌基质胶更适合类器官培养。

组织样本剪碎、酶解、过滤分离细胞团，全程冰上低温操作；细胞沉淀与预冷类器官基质胶混合，24孔板每孔点胶20–30μL胶滴；37℃孵育15–30min完全凝固，添加模基配套专用类器官培养基；每2–3天换液。

基质胶操作全程冰上进行，枪头及培养板需预冷。基质胶室温提前凝固将导致dome形态异常，类器官结构随之偏移。建议使用模基生物基质胶分装预冷盒（货号AB-YL1005）以减少操作温差。

裸鼠皮下成瘤实验中，肿瘤细胞与基质胶1:1混合后注射，基质胶为细胞提供初始ECM支架，显著提高细胞存活率与成瘤率，同时降低各动物个体间肿瘤生长差异，提升药效评价数据的统计可靠性。对于成瘤性较差的细胞系，更高蛋白浓度的基质胶可提供更强的力学支撑。

082724、082726（高浓度基质胶）——粘度较高，凝胶时间较快，更适合于体内实验（动物模型）。

对数期肿瘤细胞调整至 1×10⁸个 /mL，冰上与高浓度基质胶1:1混匀；30min内完成4–6周裸鼠腋下皮下注射，单只200μL混合液，细胞和基质胶混匀后需放置在碎冰上，维持基质胶流动性；持续监测肿瘤体积，1–4周稳定形成均一瘤体。

裸鼠周龄≥7周时免疫功能部分恢复，成瘤率显著下降，务必使用4-6周龄动物。基质胶与细胞混合后必须30min内完成注射，室温放置将导致基质胶凝固，注射困难且ECM支架结构被破坏。注射部位选择腋下中后部皮下，该部位皮肤松弛便于肿瘤生长及后续测量。

Transwell侵袭实验通过在上室聚碳酸酯膜表面铺覆基质胶层模拟基底膜屏障，区分细胞迁移与侵袭能力。基质胶稀释比例直接决定屏障厚度与力学强度：过高浓度导致细胞无法穿透（侵袭信号为零），过低浓度则屏障过薄，无法有效区分迁移与侵袭。此外，基质胶成胶均匀性与批间一致性直接影响实验重现性。

082704、082706（标准型金牌基质胶）——适合细胞增殖或分化相关的二维或三维培养，以及细胞形态的研究。

预冷无血清培养基1:8-1:10稀释标准型基质胶，均匀铺于Transwell上室，推荐24孔板每孔加入65μL基质胶；37℃凝胶1-2h后，可吸弃多余基质胶，并加入细胞悬液；细胞饥饿过夜，上室铺细胞悬液，下室添加趋化诱导完全培养基；培养

12-48h固定染色，显微镜计数穿透细胞数量。

侵袭实验无法穿透需排查：①细胞侵袭能力——建议实验前以明胶酶谱法检测MMP-2/MMP-9表达水平；②很可能是上室混有高浓度血清或者是小室孔径不对，建议核对小室的孔径；③确认基质胶的稀释比例：基质胶太厚或浓度过高导致阻力过大，细胞无法有效降解或穿透；建议标准型基质胶按照1：8比例稀释后使用。

hESC/iPSC体外培养依赖基质胶提供Laminin与Collagen IV促进贴壁与克隆形成，同时要求生长因子谱与自我更新信号通路（TGF-β/Activin-Nodal、Wnt/β-catenin）协同适配，避免自发分化。普通标准型基质胶生长因子含量高且未经干细胞专项筛选，易导致无外加分化因子条件下出现自发分化，影响干性维持与定向分化实验可控性。

082777（干细胞金牌基质胶）——在低生长因子配方基础上进一步优化筛选并附加多项干细胞功能测试，去除干扰因子。

碎冰+4℃融化基质胶，加入无血清基础培养基，按照基质胶：培养=1:80~1:100稀释；6孔/12孔板每孔铺薄层基质胶,37℃孵育1h充分包被；弃去未结合液体，接种干细胞,搭配StemGrowth series多能干细胞金牌培养基；每天换液，长期传代可稳定维持干细胞干性，自发分化率极低；诱导分化实验可调整胶浓度，调控细胞粘附与谱系分化效率。

包被前培养板及培养基均需预冷操作，避免基质胶在稀释过程中提前凝固。包被完成后可于2~8°C储存一周，使用前需放到培养箱孵育1-2h。