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一篇读懂GUS基因检测:从定位到定量,到底怎么选?

GUS基因(β-葡萄糖苷酸酶基因,β-glucuronidase)是目前分子生物学研究中应用最广泛的报告基因之一,其编码的β-葡萄糖苷酸酶是一种分布广泛的水解酶。该基因来源于大肠杆菌,在绝大多数高等植物细胞中不存在内源性GUS活性,因此,GUS基因被广泛用作转基因植物的报告基因,同时也应用于部分细菌和真菌的遗传转化研究。


根据不同研究目的和检测需求,GUS基因检测主要有以下三种方法:


01 组织化学染色法(定位检测)


组织化学染色法是GUS检测中最直观、最经典的方法。该方法以X-Gluc(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖苷酸酯)为底物。GUS酶催化X-Gluc水解,生成无色的葡萄糖醛酸和深蓝色沉淀(氯-溴靛蓝),具有GUS活性的部位或位点呈现肉眼可见的蓝色或蓝色斑点。


优点

可定位基因表达的组织和细胞位置

操作简单直观,结果可视化

适合转基因植株的快速初筛


产品推荐

GUS染色液

品牌:百瑞极

货号:BN20175

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百瑞极GUS染色液试剂盒包含GUS染色的全部试剂,使用方便。



02 分光光度法(定量检测)

β-葡萄糖苷酸酶(β-GUS)水解对硝基酚-D-葡萄糖醛酸苷生成对硝基酚(PNP),通过检测该产物在405nm处的增加速率即可得出B-GUS酶活性大小。


优点

操作相对简便,使用常规分光光度计/酶标仪即可

可进行批量样本的定量检测

灵敏度适中,适合酶活较高的样本


产品推荐

β-葡萄糖苷酸酶(β-GUS)/β-葡萄糖醛酸酶(β-G)试剂盒(可见分光光度法)

品牌:百瑞极Biorigin

货号:BN72127


β-葡萄糖苷酸酶(β-GUS)/β-葡萄糖醛酸酶(β-G)试剂盒(微板法)

品牌:百瑞极Biorigin

货号:BN72126


03 荧光分析法(定量检测)

以4-甲基伞形酮酰-β-D-葡萄糖醛酸苷酯(4-MUG)为底物, GUS催化其水解生成4-甲基伞形酮(4-MU)及β-D葡萄糖醛酸。 4-MU分子中的羟基解离后被365nm的光激发,产生455nm的荧光,通过荧光量来计算GUS酶活力。


优点

灵敏度高,可检测较微量GUS活性

可进行批量样本的定量检测

不受样本本身颜色的干扰


产品推荐

β-葡萄糖苷酸酶(β-GUS)酶活检测试剂盒(荧光法)

品牌:百瑞极

货号:BN72825



订购信息

百瑞极提供的GUS基因检测试剂盒,涵盖组织化学染色法、分光光度法、荧光法三种常用的检测方法,相关产品如下:
品牌货号中文名称规格CAS
BioriginBN20175GUS染色液50ml/
BioriginBN20175GUS染色液25ml/
BioriginBN30017X-Gluc25mg114162-64-0
BioriginBN30017X-Gluc100mg114162-64-0
BioriginBN30017X-Gluc500mg114162-64-0
BioriginBN30017X-Gluc1g114162-64-0
BioriginBN72127β-葡萄糖苷酸酶(β-GUS)/β-葡萄糖醛酸酶(β-G)试剂盒(可见分光光度法)48T/
BioriginBN72126β-葡萄糖苷酸酶(β-GUS)/β-葡萄糖醛酸酶(β-G)试剂盒(微板法)96T/
BioriginBN72825β-葡萄糖苷酸酶(β-GUS)酶活检测试剂盒-荧光法(荧光法)48T/
BioriginBN72825β-葡萄糖苷酸酶(β-GUS)酶活检测试剂盒-荧光法(荧光法)96T/
BioriginBN300044-甲基伞形酮-D-葡萄糖醛酸苷(MUG)100mg6160-80-1
BioriginBN300044-甲基伞形酮-D-葡萄糖醛酸苷(MUG)1g6160-80-1

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