一、酵母培养基种类及用途 

一缺培养基 

     用于单质粒酵母转化筛选，外源基因在酵母中的表达、异源基因功能互补、酵母单杂交和酵母双杂交初始质粒转化。 

二缺培养基 

     用于双质粒酵母转化筛选，外源基因在酵母中的表达、异源基因功能互补、酵母单杂交和酵母双杂交初始质粒转化免疫共沉淀，Y187、AH109/Y2HGold、NMY51 酵母杂交实验， 接合型二倍体筛选。 

三缺培养基 

     用于双质粒酵母转化筛选和报告基因检测，外源基因在酵母中的表达、异源基因功能互 补、酵母单杂交和双杂交报告基因检测，Y187、AH109/Y2HGold、NMY51 酵母交配实验后报 告基因分析（His3，Ade2)。 

四缺培养基 

     用于报告基因分析，酵母双杂交和酵母三杂交报告基因检测，Y187、AH109/Y2HGold、NMY51 酵母交配实验后报告基因分析（His3，Ade2)。 

五缺培养基 

     用于报告基因分析和表型分析，酵母三杂交报告基因检测(His3，Ade2)、酵母营养缺 陷型分离鉴定和表型分析。 

六缺培养基 

     用于报告基因分析、表型分析和药物毒理分析，酵母三杂交报告基因检测、酵母营养缺 陷型分离鉴定和表型分析、药物毒理分析。

Rich medium 

     Rich medium 包括 YPD、YPDA、YPD Plus 系列培养基，也可以称为完全培养基。 YPD Medium 由精选的蛋白胨、酵母提取物和葡萄糖按适当比例混合组成；YPDA 培养基是 在 YPD 培养基中添加了适量的硫酸腺嘌呤；YPD Plus 相比于 YPDA 的营养更为丰富， 可直接用于酿酒酵母感受态的复苏，可以提高转化效率。YPD Agar、YPDA Agar 分别在 YPD、YPDA 基础上加入了 Agar，作为固体培养基倒板用。YPD 系列培养基用于酿酒酵母 的常规培养。

二、酵母培养基的配制 

（1） Rich Liquid Media (Broth) 

     1. 取 50g 的 YPD/YPDA 加 1L 的去离子水中溶解； 

     2. 调节 pH 至 6.5，121℃高压灭菌 15min； 

     3. 避光、室温条件下储存灭菌培养基。 

（2） Rich Plating Media with Agar 

     1. 取 70g 的 YPD Agar/YPDA Agar 加 1L 的去离子水中溶解（琼脂在高温灭菌后溶解）； 

     2. 调节 pH 至 6.5，121℃高压灭菌 15min； 

     3. 冷却到 50℃把培养基倒入平板中，室温使其凝固，封口膜封好后倒置保存在 4℃冰箱。

（3） Minimal SD Base 

     1. 在 1L 去离子水中加入 26.7g 的 Minimal SD Base，然后再加入相应量的缺陷氨基酸， 搅拌溶解； 

     2. 调节 pH 至 5.8，121℃高压灭菌 15min； 

     3. 避光、室温条件下储存灭菌培养基。 

（4） Minimal SD Agar Base 

     1. 在 1L 去离子水中加入 46.7g 的 Minimal SD Base，然后再加入相应量的缺陷氨基酸， 搅拌溶解； 

     2. 调节 pH 至 5.8，121℃高压灭菌 15min； 

     3. 冷却到 50℃把培养基倒入平板中，室温使其凝固，封口膜封好后倒置保存在 4℃冰箱。

（5） DO（缺陷氨基酸）类培养基的配制 

     1. 在 1L 去离子水中加入相应量的 DO 培养基，然后再加入 26.7g Minimal SD Base，搅拌 溶解； 

     2. 调节 pH 至 5.8，121℃高压灭菌 15min； 

     3. 4℃冰箱避光储存已经灭菌的液体培养基。

     或：1. 在 900ml 去离子水中加入相应量的 DO 培养基，然后再加入 6.7g YNB，搅拌溶解； 

     2. 调节 pH 至 5.8，121℃高压灭菌 15min；

     3. 4℃冰箱避光储存已经灭菌的液体培养基； 

     4. 使用时再加入 100ml 已灭菌的 20%葡萄糖。

（6） SC（缺陷氨基酸+YNB）类培养基的配制

     1. 在 1L 去离子水中加入相应量的 SC 培养基，然后再加入 20g 葡萄糖，搅拌溶解； 

     2. 调节 pH 至 5.8，121℃高压灭菌 15min； 

     3. 4℃冰箱避光储存已经灭菌的液体培养基；

     或：1. 在 900ml 去离子水中加入相应量的 SC 培养基，搅拌溶解； 

     2. 调节 pH 至 5.8，121℃高压灭菌 15min； 

     3. 4℃冰箱避光储存已经灭菌的液体培养基； 

     4. 使用时再加入 100ml 已灭菌的 20%葡萄糖。 

（7） SD（缺陷氨基酸+YNB+葡萄糖）类培养基的配制 

     1. 在 1L 去离子水中加入相应量的 SD 培养基，搅拌溶解； 

     2. 调节 pH 至 5.8，121℃高压灭菌 15min； 

     3. 4℃冰箱避光储存已经灭菌的液体培养基。 

（8） SD with Agar（缺陷氨基酸+YNB+葡糖糖+Agar）类培养基的配制 

     1. 在 1L 去离子水中加入相应量 SD with Agar 培养基，搅拌溶解（琼脂在高温灭菌后溶解）；

     2. 调节 pH 至 5.8，121℃高压灭菌 15min；

     3. 冷却到 50℃把培养基倒入平板中，室温使其凝固，封口膜封好后倒置保存在 4℃冰箱。

注意事项： 

     1. 在配制酵母缺陷培养基时，培养基会变色，由浅黄到深褐色不等，对酵母的生长不会产 生严重影响。 

     2. DO 类和 SC 类培养基均不含葡萄糖。葡萄糖高温灭菌会有碳化现象，控制好灭菌温度和时间，葡萄糖的微量碳化对实验并无太大影响。如有特殊要求可将 20%葡萄糖单独灭菌，待使用时再加入。

     3. 缺陷培养基的 PH 值在 5.5-6.5 范围内都是比较适合酵母生长的，此类试剂粉末的 PH 已 经过调试，使用时只需要稍微调整即可。