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植物基因组DNA提取试剂盒
  • 产品货号:
    BN12050
  • 中文名称:
    植物基因组DNA提取试剂盒
  • 英文名称:
    Plant DNA Extraction Kit
  • 品牌:
    Biorigin
  • 货号

    产品规格

    售价

    备注

  • BN12050-50T

    50T

    ¥500.00

产品描述

保存条件 

      10~25℃保存 12 个月。 

产品简介 

      本试剂盒采用高效结合核酸的离心柱配合独特的缓冲液系统,适合从 50~100 mg 普通植物中提取基 因组 DNA。试剂盒基于硅胶柱纯化技术,提取过程中无需使用有毒的酚氯仿,整个提取过程只需 30~40 min,可最大限度去除植物组织中的杂质,提取的基因组 DNA 片段完整、纯度高,可直接用 于下游 PCR 扩增、qPCR、分子标记以及文库构建等实验。 

产品特点 

  ⚫ 操作简便:30~40 min 内完成数个样品的基因组 DNA 提取; 

  ⚫ 安全低毒:无需酚、氯仿等有毒试剂; 

  ⚫ DNA 纯度高:提取的基因组 DNA 无杂质残留,适用于对纯度、完整性要求很高的下游实验。

适用范围 

       本产品适用于普通植物样品的基因组 DNA 提取。 

注意事项 

   1. 第一次使用前应在 Buffer GP3 和 Buffer GW2 中加入无水乙醇,加入量请参考瓶上标签; 

   2. 植物组织样品应避免反复冻融,否则会导致提取的基因组 DNA 片段小且得率低; 

   3. 使用前请检查 Buffer GP1 和 Buffer GP2 是否出现结晶或者沉淀,如有沉淀,请置于 37℃水浴 溶解摇匀后使用;

   4. 本试剂盒所有离心操作均在室温下进行。 

使用方法 

   1. 取植物新鲜组织 50~100 mg 或干重组织 20 mg,加入液氮充分研磨。加入 400 μL Buffer GP1 和 6 μL RNase A(10 mg/mL),涡旋振荡 1 min,室温放置 10 min,使其充分裂解; 

   2. 加入 130 μL Buffer GP2,充分混匀,涡旋振荡 1 min; 

   3. 12,000 rpm(~13,400×g)离心 5 min,将上清移至新的离心管中;

   4. 加入 1.5 倍体积的 Buffer GP3(使用前检查是否已加入无水乙醇)(例如 500 μL 上清液加入 750 μL Buffer GP3),立即振荡 15 s 充分混匀,此时可能出现絮状沉淀但不影响后续实验; 

   5. 将上步所得溶液和沉淀分两次加入到吸附柱DNA Columns 中(吸附柱放入收集管中),12,000  rpm(~13,400×g)离心 30 s,弃废液,将吸附柱重新放回收集管中;

   6. 向吸附柱中加入 600 μL Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12,000 rpm(~13,400 ×g)离心 30 s,弃废液,将吸附柱重新放回收集管中;

注意:如吸附膜呈现绿色,向吸附柱中加入 500 μL 无水乙醇,12,000 rpm(~13,400×g)离心 30 s, 弃废液,将吸附柱重新放回收集管中。

   7. 重复步骤 6;

   8. 12,000 rpm(~13,400×g)离心 2 min,弃废液。将吸附柱开盖置于室温数分钟,以彻底晾干吸 附材料中残余的漂洗液; 

注意:此步骤目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,漂洗液中乙醇的残留可能会影响后续的酶反应实验(酶 切、PCR 等)。 

   9. 将吸附柱放到一个干净离心管中,向吸附膜的中间部位悬空滴加 50~200 μL Buffer TE 或 ddH2O, 室温放置 2~5 min,12,000 rpm(~13,400×g)离心 2 min,收集 DNA 溶液,如果要增加基 因组 DNA 的得率,可以将离心得到的溶液重新加至吸附膜上,重复洗脱。将洗脱的 DNA 溶液 置于-20℃保存。 

注意:如果下游实验对 pH 值或 EDTA 敏感,建议用 ddH2O 洗脱,若用 ddH2O 洗脱应保证其 pH 值在7.0~8.5(可以用 NaOH 将水的 pH 值调到此范围);若需长期保存,推荐使用 Buffer TE 洗脱后置于- 20℃保存。

常见问题与解决办法 

Q1:柱子出现堵塞? 

A1:

   1) 样品用量过多。建议按照说明书推荐量进行提取; 

   2) 样品富含多糖多酚类物质。处理富含多糖多酚的组织,推荐用专用试剂盒; 

   3) 离心温度过低。本产品使用操作均在室温下进行。 

Q2:DNA 提取得率低? 

A2: 

   1) 样品用量过少。建议按照说明书推荐量进行提取;

   2) 样品材料质量不好。尽量选用新鲜组织样品,样品采集后应液氮速冻,然后置于-80℃保存,建议尽快提取,避免反复冻融; 

   3) 样品裂解不充分。若样品过量则适当减少样品量,加入 Buffer GP1 后需涡旋振荡 1min 使其充分混匀,可适当延长裂解时间。 

Q3:提取的 DNA 中有 RNA 污染? 

A3:

   1) 未加入 RNase A 消化。请按照说明书要求加入 RNase A 消化;

   2) 样品中 RNA 含量过多。可适当增加 RNase A 用量或延长消化时间。