中文名称：SUPER Green I(效果同 SYBR Green I)核酸染料(10,000×DMSO 溶液)(电泳级)

货号：DE0133-50μl

规格：50μl

保存条件：-20°C 避光保存

    本品用 DMSO 溶解，因 DMSO 的熔点是 18.5℃，使用前请放置到室温充分溶解。

一、胶染法(用法同 EB)(推荐方法，见图 1)

1、制胶时加入 SUPER Green I 核酸染料。冷却胶至 50℃左右，每 100ml 胶中加入 3～5μl SUPER Green I 核酸染料。

2、按照常规方法进行电泳即可。

注：此方法染色可以准确确定核酸片段分子量，染料用量相对较少。1ml 染料大约可以做 300块 100ml 的胶。

二、点染法 (见图 3) 

1、该方法适于琼脂糖凝胶电泳和 PAGE 凝胶电泳。

2、工作液的配制：用电泳缓冲液将 10000×的 SUPER Green I 稀释 100 倍，即为 SUPERGreen I 工作液。SUPER Green I 工作液可以置 2～8℃保存一个月以上。

3、制胶：按常规方法制胶，不含任何染料。4、样品染色：向分析样品中加入 SUPER Green I 工作液和载样缓冲液，室温放置 10 分钟，使 SUPER Green I 与样品中 DNA 充分结合。SUPER Green I 工作液加入量为总上样量的 1/5～ 1/10。

5、DNA Marker 染色：将 5μl DNA Marker、5μl DNA Marker 稀释液和 1μl SUPER Green I 工作液混匀，室温放置 5 分钟，使 SUPER Green I 与 DNA 充分结合。

6、上样、电泳：按常规操作。

注：用点染法染色时，灵敏度最高，染料用量最少。但大片段稍有滞后现象，如果需要更准确确定分子量(与 Marker 对比)，建议使用胶染法。

三、泡染法

1、按照常规方法进行电泳。

2、用 pH 7.0～8.5 的缓冲液(如：TAE，TBE 或 TE)，按照 10000﹕1 的比例稀释 SUPERGreen I 浓缩液，混匀，制成染色溶液。

3、将染色溶液倒入合适的聚丙烯容器中，放入凝胶，用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染色 10～30 分钟，染色时间因凝胶浓度和厚度而定。聚丙烯酰胺凝胶直接在玻璃平皿上染色，将配好的稀释溶液轻轻地倒在胶板上，让稀释液均匀地覆盖整个胶板，并染色 30分钟。玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理(避免染料吸附在玻璃表面上)。

注：用泡染法染色时，可以精确确定核酸片段分子量。但染料用量是三种方法中最多的。

四、点染+胶染法(见图 2) 

此法结合方法 1 和方法 2，灵敏度最高，对于低浓度样本比 EB 检测更灵敏。几种染色方法特点比较

SUPER Green I 使用注意事项

1、在 SUPER Green I 点染法中，电泳时间不要超过 2 小时，否则 SUPER Green I 会从DNA 上分离出来，会产生弥散状条带。

2、用点染方法染色时，条带稍有滞后现象，如果需要确定片段精确分子量(与 Marker 对比)，建议使用胶染法(方法 1)。

3、在常规用酒精沉淀核酸的过程中，SUPER Green I 可以全部从双链核酸上去掉。

4、如果想对用 SUPER Green I 染过的胶进行 Southern blots，建议在预杂化和杂化溶液中加入 0.1%～0.3% 的 SDS。

5、在紫外照射透视下，与双链 DNA 接合的 SUPER Green I 呈现绿色荧光。如果胶中含有单链 DNA 则颜色为橘黄而不是绿色。

6、SUPER Green I 对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器。